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二氧化碳培養箱的使用要點及注意事項
 
  二氧化碳培養箱是醫院實驗室普遍使用的常規儀器之一。二氧化碳培養箱能在箱體內模擬形成一個細胞、組織在生物體內的生長環境。箱內具有恒定的酸堿度(pH值:7.27.4)、穩定的溫度(37℃)、較高的相對濕度(95%)、穩定的CO2水平(5%)。本文介紹了二氧化碳培養箱的正確使用方法和注意要點。
 

 

  一定要做好使用前的準備工作:
 
  二氧化碳培養箱應由專人負責使用,操作盤上的任何開關和調節旋鈕一旦固定后,不要隨意扭動,以免影響箱內溫度,二氧化碳濃度、濕度的波動,同時降低機器的靈敏度。箱子的放置要水平,避免陽光直射和灰塵等,要保證儀器周圍的氣流循環,后部及側面應留出5cm的空隙。加裝穩壓電源保證電源電壓波動不超過220V+10%。所加入的水必須是蒸餾水或無離子水,防止礦物質儲積在水箱內產生腐蝕作用,經常檢查箱內水是否足夠,水位應加至“水位指示燈”滅燈時為止。使用前箱內應用消毒酒精或碘溶液*擦洗,防止其他微生物污染,導致實驗失敗。在房間安裝空調,使環境溫度保持在25度左右。所使用的二氧化碳必須是純凈的,否則降低二氧化碳傳感器的靈敏度和污染二氧化碳過濾裝置。
 
  正確充氣延長二氧化碳傳感器使用壽命:
 
  二氧化碳培養箱箱內氣壓由二氧化碳氣體傳感器控制。二氧化碳傳感器正常反饋要求進氣壓為0.06MPa。當箱內氣壓降低時,二氧化碳傳感器在低壓刺激下有節奏地開閉,向箱內慢慢充氣,當進氣壓達0.1MPa時,自動停止調節。如充氣方法不當,使進氣壓力增大,當超過0.1MPa甚至0.2MPa壓力,會損傷二氧化碳傳感器。開始這種損傷效應不明顯,不易察覺,反復錯誤操作,二氧化碳傳感器損傷累積最終致命損壞,使氣壓調節失靈。因此,二氧化碳傳感器壽命與二氧化碳進氣壓大小有關,只要做好進氣壓調節,就能保護二氧化碳傳感器性能。二氧化碳傳感器價格昂貴,更換不易,所以一定要做好進氣壓調節,延長二氧化碳傳感器使用壽命。
 
  做培養時注意培養箱濕度:
 
  箱內濕度對于培養工作來說是一項非常重要然而又經常被忽略的因素。因為飽和濕度環境可以避免培養液中二氧化碳逃逸,培養液中ph值穩定,有利用細胞生長,足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復速度(如在開關門后)才能保證不會由于過度干燥而導致培養失敗。所以二氧化碳培養箱使用過程中,在箱內托盤中放一定量的滅菌水(3/2至全盤),使箱內成為飽和濕度環境如使用者忘記不加水,使培養細胞處于低濕度甚至干熱環境中,培養液二氧化碳氣體易揮發,液體PH值升高,影響細胞生長,在工作中要力求避免此問題發生。樣本多時,箱內分區存放,培養物用筐或瓷盤存放,這樣存取快速,縮短開門時間,減少箱內氣體和濕度變化,節省氣體,穩定了細胞生長環境。
 
  防止二氧化碳培養箱污染做好箱內消毒:
 
  二氧化碳培養箱污染是導致細胞培養失敗的一個主要因素,所以要減少和防止污染的發生,主要途徑是盡量減少微生物可以生長的區域和表面,采取消毒措施。例如,針對箱內濕熱環境易滋生細菌等問題,我們采用在1000ml水中加2ml新潔而滅液,定期用酒精和紫外線消毒箱內空氣,培養物酒精擦拭入箱內,盤里的水至少要一周換一次,控制污染,可以維持適應的蒸發作用,減少箱內微生物滋生速度。為了培養箱免受污染并且保證儀器箱體內的生物清潔性,有些二氧化碳培養箱設計了自動排除污染裝置來有效防止污染的產生。目前有多種消毒滅菌方式,如帶有紫外消毒功能CO2培養箱。還有的設計生產了HEPA過濾器能過濾培養箱內空氣,可過濾除去99.97%的0.3um以上的顆粒,此外,還有設計了能使箱內達到高溫濕熱的環境從而殺死污染微生物,達到消毒滅菌目的培養箱。